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专注ELISA试剂盒16年

白介素类的ELISA试剂盒实验条件

views:266 publish:2023-09-19 09:48:39

实验条件

ELISA试剂盒白介素类检测抗体多用间接型ELISA,以纯化抗原包被载体,经4℃过夜,以无关蛋白封闭至少2小时以上,加入待测样品,室温孵育1小时,洗涤干净后加酶标抗体,再经室温孵育、洗涤后,以底物显色,显色到一定程度终止反应,在酶标仪上读结果或以肉眼判断。

固相载体:

可作为固相载体的物质很多,如:纤维素、聚丙烯酰胺、聚苯乙烯、聚丙烯、交联葡聚糖、玻璃、硅橡胶、琼脂糖凝胶等。可以各种形式出现;试管、微量反应板凹孔、小珠.....常用的是聚苯乙烯制品,其吸附性好,固相包被的机制一般不外乎物理吸附和共价交联。

类 型:

ELISA具体方法的类型繁多,试剂的标准化问题还未最后解决,温育的时间、温度、洗涤液的种类及洗涤次数等都是影响测定的因素。但参考以上基本过程,ELISA试剂盒无论怎样变化,均离不开抗原-抗体反应、酶标抗体的免疫学反应及酶催化作用。

特  点:

1、敏感性高,可检出浓度在ug~mg/ml水平;
2、特异性强;

3、重复性好;

4、快速、简便、廉价。

 

封闭:

以无关蛋白占据载体上未被包被的空隙,常用的封闭液是1%牛血清白蛋白或10%小牛血清。

待测样品:

稀释度要合适,浓度太大会发生非特异性吸附造成假阳性,过分稀释会影响抗原-抗体之间的免疫学反应。选择zui适稀释度,在实验体系中取光密度在1.0左右的稀释度为宜。

酶结合物:

ELISA试剂盒使用高质量的酶结合物是ELISA成功的关键。

温馨提示:在进行ELISA实验时,先可以把自己以购买的ELISA试剂盒说明书完整的看一遍,再进行操作。如在操作的过程中有出错或遗漏,请联系ELISA试剂盒厂商咨询。



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